國產(chǎn)vs進(jìn)口，熒光定量PCR預混液真實(shí)測評
發(fā)布時(shí)間：2019.11.14
2款國際大牌，3款國內品牌，共5款探針?lè )晒舛縋CR預混液，擴增效率與特異性真實(shí)測評。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（real-time qPCR）實(shí)驗在分子生物學(xué)研究中越來(lái)越普遍?，F在常用兩種熒光定量方法：SYBR Green I嵌合熒光染料法，和TaqMan探針?lè )?。染料法成本較低，使用方便，是最常用的熒光定量方法；探針?lè )ǔ杀据^高，但是定量結果更準確。
挑選一款質(zhì)量好的擴增產(chǎn)品對于實(shí)驗結果有至關(guān)重要的作用。新手們對于如何判斷一款qPCR預混液的好壞有點(diǎn)迷茫，常常會(huì )出現一個(gè)誤區：擴增效率越高越好。
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為什么不是效率越高越好？產(chǎn)物的特異性怎么判斷？國產(chǎn)品牌和進(jìn)口品牌的差距在哪里？通過(guò)下面的實(shí)驗就可以看出來(lái)。
5種品牌的TaqMan探針?lè )?/strong>熒光定量PCR預混液，同時(shí)用相同的模板DNA和引物進(jìn)行擴增。擴增曲線(xiàn)如下：
可以看出擴增曲線(xiàn)都正常，除了國產(chǎn)品牌C的Ct值較大，即擴增效率較低外，其余4個(gè)品牌的Ct值均接近。但是它們真實(shí)地反映了目標產(chǎn)物的實(shí)時(shí)擴增情況嗎？
我們對以上qPCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，根據產(chǎn)物大小可以直觀(guān)地判斷其特異性：
品牌A和品牌D的產(chǎn)物存在明顯的非特異性擴增；品牌C的產(chǎn)物大小不正確，完全是非特異性擴增；東盛生物（一款探針?lè )ê蛢煽钊玖戏ǎ┖推放艬的產(chǎn)物是特異的。
通過(guò)對比我們發(fā)現，擴增效率不是越高越好，產(chǎn)物特異才是最重要的！
首次使用的引物，不論是進(jìn)行染料法定量的，還是探針?lè )ǘ康?，都建議通過(guò)DNA電泳來(lái)直觀(guān)判斷其特異性。當然，染料法定量的特異性也可以借助熔解曲線(xiàn)來(lái)判斷。
以上只是我們對比測評的一組結果，綜合多次、多品牌、多類(lèi)型的對比結果，從整體水平來(lái)看，進(jìn)口大牌的qPCR預混液比國產(chǎn)品牌質(zhì)量更可靠，但也不是全部都表現很好。
東盛生物qPCR Mix不斷優(yōu)化升級，與眾多國際品牌對比均表現突出。
東盛生物熒光定量PCR預混液核心成分為類(lèi)抗體技術(shù)修飾的熱啟動(dòng)酶，完美平衡了特異性與擴增效率。
特異性過(guò)高會(huì )抑制擴增效率，擴增效率過(guò)高會(huì )降低特異性，因此保持特異性和擴增效率在一個(gè)平衡的位置是qPCR Mix的技術(shù)難題。
東盛生物擁有超過(guò)十年的PCR技術(shù)研發(fā)經(jīng)驗，經(jīng)過(guò)反復嘗試，不斷優(yōu)化，得到了兼顧特異性與擴增效率的qPCR Mix。
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廣州東盛生物科技有限公司（Dongsheng Biotech Co., Ltd）成立于2005年1月，是一家專(zhuān)注于研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售優(yōu)質(zhì)生命科學(xué)產(chǎn)品的高新技術(shù)企業(yè)。
公司產(chǎn)品線(xiàn)以PCR技術(shù)為核心，聚焦于普通PCR、qPCR、多重PCR，DNA電泳以及核酸純化等分子生物學(xué)技術(shù)。產(chǎn)品主要應用于基礎生命科學(xué)研究。
產(chǎn)品遠銷(xiāo)亞洲、歐洲和美洲等二十多個(gè)國家和地區，憑借優(yōu)秀的產(chǎn)品質(zhì)量和專(zhuān)業(yè)的技術(shù)支持，我們的產(chǎn)品獲得了極佳的國際口碑。
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