Fast DNA Library Plus Prep Kit?for MGI
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【產(chǎn)品名稱(chēng)】
Fast DNA Library Plus Prep Kit?for MGI
【貨號/規格】
KM004-A（24?rxns）；KM004-B（96?rxns）；試用裝（6?rxns）
【產(chǎn)品簡(jiǎn)述】
本試劑盒針對 MGI?高通量測序平臺，提供了一管式便捷、通用的 DNA 文庫構建方案，將片段化、末端補平和末端加 A 結合到一個(gè)步驟，大大縮短了建庫的時(shí)間、減少了繁瑣步驟造成的誤差，片段化和末端修復后的產(chǎn)物可直接進(jìn)行接頭連接，不需額外純化，后續操作和#KM001 Fast DNA Library Prep Kit?for MGI操作相同。完整的文庫定量可將文庫稀釋至合適濃度，用雙鏈 DNA 熒光染料方法（如Thermo Qubit Flex Fluorometer）或 qPCR 絕對定量方法。
【樣本類(lèi)型】
表 1 常用DNA推薦投入量
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應用 |
樣本類(lèi)型 |
推薦投入量 |
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全基因組測序 |
高質(zhì)量復雜基因組 |
50ng-1μg |
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全外顯子靶向捕獲測序 |
高質(zhì)量復雜基因組 |
10ng-1μg |
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全基因組靶向捕獲測序 |
FFPE DNA |
≥50ng |
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全基因組測序 |
微生物基因組 |
1ng-1μg |
推薦使用 TE 或超純水溶解 DNA 樣品，如樣品中含有 EDTA，則需磁珠純化或加入一定體積的 Neutralization Buffer 中和。
【儲存條件及有效期】
所有試劑均應保存于-20℃，Ligation Buffer 在低溫下會(huì )有晶體析出，屬正?，F象， 應平衡至室溫后使用，產(chǎn)品有效期為 12 個(gè)月。
【組成成分】
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組分 |
24 rxns |
96 rxns |
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FEP Buffer |
120?μl |
480?μl |
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FEP Enzyme Mix |
240?μl |
2×480?μl |
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Fast DNA Ligase |
120?μl |
2×240?μl |
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Fast Ligation Buffer |
600?μl |
4×600?μl |
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2× HIFI Library PCR Master Mix |
600?μl |
4×600?μl |
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Primer Mix?for MGI * |
120?μl |
480?μl |
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Neutralization Buffer |
120?μl |
480?μl |
*FEP Buffer 為片段化、末端修復的反應 buffer，FEP Enzyme Mix 為片段化、末端修復相關(guān)酶混合物。
*若有多個(gè)樣本，則推薦使用#KM002 和#KM003 接頭引物組合，本試劑盒提供一套引物，引物序列如下：
5’-TGTGAGCCAAGGAGTTG-3’
5’-GAACGACATGGCTACGA-3’
備注：分選磁珠推薦使用#NC1011 GDSPure?DNA Selection Magbeads 或 AMPure XP beads。